તમારા બ્રાઉઝરમાં Javascript હાલમાં અક્ષમ છે. Javascript અક્ષમ હોય ત્યારે આ વેબસાઇટની કેટલીક સુવિધાઓ કામ કરશે નહીં.
તમારી ચોક્કસ વિગતો અને રસ ધરાવતી ચોક્કસ દવા સાથે નોંધણી કરાવો અને અમે તમારા દ્વારા પ્રદાન કરેલી માહિતીને અમારા વ્યાપક ડેટાબેઝમાંના લેખો સાથે મેચ કરીશું અને તમને તરત જ PDF કોપી ઇમેઇલ કરીશું.
બાન-લેન-જેન ગ્રાન્યુલ્સ ગટ માઇક્રોબાયોટાને મોડ્યુલેટ કરીને અને આંતરડાના SCFA ડેરિવ્ડ-GLP-1 ઉત્પાદનને પુનઃસ્થાપિત કરીને ઉંદરોમાં ડેક્સ્ટ્રાન સોડિયમ સલ્ફેટ-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસને ઓછું કરે છે.
જિયાઓ પેંગ,1-3,*લી શી,4,*ઝેંગ લિન,3,5 ડુઆન લિફાંગ,1 ગાઓ ઝેંગ્ઝિયાન,2,5 ડીહુ,1 લી જી,6 લી શિયાઓફેંગ,6 શેન શિયાઓફેંગ,5 શિયાઓ હૈતાઓ21પેકિંગ યુનિવર્સિટી શેનઝેન હોસ્પિટલ ડિપાર્ટમેન્ટ ઓફ ફાર્મસી, શેનઝેન, પીપલ્સ રિપબ્લિક ઓફ ચાઇના; 2શેનઝેન યુનિવર્સિટી હેલ્થ સાયન્સ સેન્ટર સ્કૂલ ઓફ ફાર્મસી, શેનઝેન, પીપલ્સ રિપબ્લિક ઓફ ચાઇના; 3ગુઇઝોઉ મેડિકલ યુનિવર્સિટી એન્જિનિયરિંગ ટેકનોલોજી રિસર્ચ સેન્ટર ઓફ એથનિક મેડિસિન એન્ડ ટ્રેડિશનલ ચાઇનીઝ મેડિસિન ડેવલપમેન્ટ એન્ડ એપ્લીકેશન મિનિસ્ટ્રી ઓફ એજ્યુકેશન, ગુઇઝોઉ પ્રોવિન્સિયલ કી લેબોરેટરી ઓફ ફાર્મસી, ગુઇઝોઉ મેડિકલ યુનિવર્સિટી, ગુઇયાંગ, પીપલ્સ રિપબ્લિક ઓફ ચાઇના; 4 ગેસ્ટ્રોએન્ટેરોલોજી વિભાગ, પેકિંગ યુનિવર્સિટી શેનઝેન હોસ્પિટલ, શેનઝેન, પીપલ્સ રિપબ્લિક ઓફ ચાઇના; 5 સ્કૂલ ઓફ ફાર્મસી, ગુઇઝોઉ મેડિકલ યુનિવર્સિટી, સ્ટેટ કી લેબોરેટરી ઓફ મેડિસિનલ પ્લાન્ટ ફંક્શન એન્ડ એપ્લીકેશન, ગુઇયાંગ; 6 લેબોરેટરી મેડિસિન વિભાગ, પેકિંગ યુનિવર્સિટી શેનઝેન હોસ્પિટલ, શેનઝેન, ચીન [email protected] શેન ઝિયાંગચુન, સ્કૂલ ઓફ ફાર્મસી, ગુઇઝોઉ મેડિકલ યુનિવર્સિટી, ગુઇઝોઉ, પીપલ્સ રિપબ્લિક ઓફ ચાઇના, 550004, ઇમેઇલ [email protected] ઉદ્દેશ્ય: GLP-1-આધારિત ઉપચાર એ બળતરા આંતરડા રોગ માટે એક નવો સારવાર વિકલ્પ છે.બાન-લેન-જેન (BLG) ગ્રાન્યુલ્સ એક જાણીતું એન્ટિવાયરલ TCM ફોર્મ્યુલેશન છે જે વિવિધ બળતરા પરિસ્થિતિઓની સારવારમાં સંભવિત બળતરા વિરોધી પ્રવૃત્તિ દર્શાવે છે.જોકે, કોલાઇટિસ પર તેની બળતરા વિરોધી અસર અને તેની ક્રિયા કરવાની પદ્ધતિ હજુ પણ અસ્પષ્ટ છે.પદ્ધતિઓ: ઉંદરોમાં ડેક્સ્ટ્રાન સોડિયમ સલ્ફેટ (DSS)-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસ સ્થાપિત કરવા.BLG ની રક્ષણાત્મક અસરનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે રોગ પ્રવૃત્તિ સૂચકાંકો, ઇજાના હિસ્ટોલોજીકલ માર્કર્સ અને પ્રોઇન્ફ્લેમેટરી સાયટોકાઇન સ્તરો કરવામાં આવ્યા હતા.ગટ માઇક્રોબાયોટા અને આંતરડા પર BLG ની અસરો સીરમ GLP-1 સ્તરો અને કોલોનિક Gcg, GPR41, અને GRP43 અભિવ્યક્તિ, ગટ માઇક્રોબાયોટા રચના, ફેકલ SCFAs દ્વારા વર્ગીકૃત કરવામાં આવી હતી. સ્તર, અને પ્રાથમિક માઉસ કોલોનિક એપિથેલિયલ કોષો SCFA-ઉત્પન્ન GLP-1 ઉત્પાદનમાંથી GLP-1 મુક્તિ. પરિણામો: BLG સારવારથી શરીરના વજનમાં ઘટાડો, DAI, કોલોન શોર્ટનિંગ, કોલોન ટીશ્યુ નુકસાન અને કોલોન ટીશ્યુમાં TNF-α, IL-1β, અને IL-6 ના પ્રોઇન્ફ્લેમેટરી સાયટોકાઇન સ્તરમાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો. વધુમાં, BLG સારવાર કોલાઇટિસ ઉંદરોમાં કોલોનિક Gcg, GPR41 અને GRP43 અભિવ્યક્તિ અને સીરમ GLP-1 સ્તરને નોંધપાત્ર રીતે પુનઃસ્થાપિત કરી શકે છે, અને Akkermansia અને Prevotellaceae_UCG-001 જેવા SCFA-ઉત્પાદક બેક્ટેરિયાને વધારીને, અને Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas અને Oscillibacter જેવા બેક્ટેરિયાની વિપુલતા ઘટાડીને. વધુમાં, BLG સારવાર કોલાઇટિસ ઉંદરના મળમાં SCFAs ના સ્તરમાં નોંધપાત્ર વધારો કરી શકે છે. તે જ સમયે, ઇન વિટ્રો પ્રયોગો એ પણ દર્શાવે છે કે BLG-સારવાર કરાયેલા ઉંદરોના મળના અર્કથી GLP-1 સ્ત્રાવ કરતા પ્રાથમિક નાના મુરિન કોલોનિક ઉપકલા કોષોને મોટા પ્રમાણમાં ઉત્તેજિત કરી શકાય છે. તારણો: આ તારણો સૂચવે છે કે BLG માં કોલાઇટિસ વિરોધી અસર છે. BLG ને ઉપચાર તરીકે વિકસાવવાની ક્ષમતા છે, ઓછામાં ઓછા અંશતઃ આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાને મોડ્યુલેટ કરીને અને આંતરડાના SCFA-ઉત્પન્ન GLP-1 ઉત્પાદનને પુનઃસ્થાપિત કરીને ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસ માટે આશાસ્પદ દવાઓ. કીવર્ડ્સ: કોલાઇટિસ, બાન-લેન-જેન ગ્રાન્યુલ્સ, ગટ માઇક્રોબાયોટા, શોર્ટ-ચેઇન ફેટી એસિડ્સ, GLP-1
અલ્સેરેટિવ કોલાઇટિસ (UC) એ કોલોન અને ગુદામાર્ગનો લાંબા ગાળાનો બળતરા રોગ છે જે વારંવાર ઝાડા, પેટમાં દુખાવો, વજન ઘટાડવું અને મ્યુકોપ્યુર્યુલન્ટ લોહીવાળું મળ દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે.1 તાજેતરમાં, પશ્ચિમી જીવનશૈલીની વધતી જતી લોકપ્રિયતા સાથે, ચીન સહિત અગાઉ ઓછા બનાવ ધરાવતા દેશોમાં UC નો વ્યાપ વધી રહ્યો છે.2 આ વધારો જાહેર આરોગ્ય માટે મોટી સમસ્યાઓ ઉભી કરે છે અને દર્દીઓની કામ કરવાની ક્ષમતા અને જીવનની ગુણવત્તા પર ગંભીર અસરો ધરાવે છે.નોંધનીય રીતે, UC નું રોગકારક ઉત્પત્તિ મોટે ભાગે અસ્પષ્ટ રહે છે, પરંતુ સામાન્ય રીતે સ્વીકારવામાં આવે છે કે આનુવંશિકતા, પર્યાવરણીય પરિબળો, આંતરડાના માઇક્રોબાયોટા અને રોગપ્રતિકારક શક્તિ બધા UC ના વિકાસમાં ફાળો આપે છે.3 હજુ પણ, UC માટે કોઈ ઈલાજ નથી, અને સારવારનો ધ્યેય ક્લિનિકલી ક્લિનિકલ લક્ષણોને નિયંત્રિત કરવા, માફી પ્રેરિત કરવા અને જાળવવા, મ્યુકોસલ હીલિંગને પ્રોત્સાહન આપવા અને પુનરાવૃત્તિ ઘટાડવાનો છે.શાસ્ત્રીય સારવારમાં એમિનોસેલિસીલેટ્સ, કોર્ટીકોસ્ટેરોઈડ્સ, ઇમ્યુનોસપ્રેસન્ટ્સ અને બાયોલોજિક્સનો સમાવેશ થાય છે.જોકે, આ દવાઓ તેમની વિવિધ આડઅસરોને કારણે ઇચ્છિત અસર પ્રાપ્ત કરી શકતી નથી.4 તાજેતરમાં, ઘણા કેસ સ્ટડીઝે દર્શાવ્યું છે કે પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવા (TCM) એ મોટી સંભાવના દર્શાવી છે. ઓછી ઝેરી અસર સાથે UC ને દૂર કરવામાં મદદ કરે છે, જે સૂચવે છે કે નવી TCM ઉપચાર પદ્ધતિઓનો વિકાસ UC.5-7 માટે એક આશાસ્પદ સારવાર વ્યૂહરચના છે.
બેનલેન્જેન ગ્રાન્યુલ્સ (BLG) એ બેનલેન્જેન મૂળના પાણીના અર્કમાંથી બનેલી પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવાની તૈયારી છે.8 તેની એન્ટિવાયરલ અસરકારકતા ઉપરાંત, BLG વિવિધ બળતરા પરિસ્થિતિઓની સારવારમાં સંભવિત બળતરા વિરોધી પ્રવૃત્તિ દર્શાવે છે.9,10 વધુમાં, ગ્લુકોસિનોલેટ્સ (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin અને glucoside ને રેડિક્સ ઇસાટીડિસના જલીય અર્ક) અને ન્યુક્લિયોસાઇડ્સ (હાયપોક્સેન્થિન, એડેનોસિન, યુરીડીન અને ગુઆનોસિન) અને ઈન્ડિગો અને ઈન્ડિરુબિન જેવા ઈન્ડિગો આલ્કલોઇડ્સમાંથી અલગ કરીને ઓળખવામાં આવ્યા છે.11,12 અગાઉના અભ્યાસોએ સારી રીતે દસ્તાવેજીકરણ કર્યું છે કે કોલાઇટિસના વિવિધ પ્રાણી મોડેલોમાં એડેનોસિન, યુરીડીન અને ઈન્ડિરુબિન સંયોજનો શક્તિશાળી એન્ટિ-કોલાઇટિસ અસરો દર્શાવે છે.13-17 જો કે, કોલાઇટિસમાં BLG ની અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે કોઈ પુરાવા-આધારિત અભ્યાસ હાથ ધરવામાં આવ્યા નથી. વર્તમાન અભ્યાસમાં, અમે ડેક્સ્ટ્રાન સોડિયમ સલ્ફેટ (DSS)-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસ પર BLG ની રક્ષણાત્મક અસરની તપાસ કરી. C57BL/6 ઉંદરોમાં કરવામાં આવેલા અભ્યાસમાં જાણવા મળ્યું કે BLG ના મૌખિક વહીવટથી ઉંદરોમાં DSS-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલોન બળતરામાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો છે, તેની નિયમનકારી પદ્ધતિઓ આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાના મોડ્યુલેશન અને આંતરડામાંથી મેળવેલા ગ્લુકોગન-જેવા પેપ્ટાઇડ-1 (GLP-1) ઉત્પાદનની પુનઃસ્થાપના સાથે સંકળાયેલી છે.
BLG ગ્રાન્યુલ્સ (ખાંડ-મુક્ત, NMPA-મંજૂર Z11020357; બેઇજિંગ ટોંગરેન્ટાંગ ટેકનોલોજી ડેવલપમેન્ટ કંપની લિમિટેડ, બેઇજિંગ, ચીન; બેચ નંબર: 20110966) ફાર્મસીઓમાંથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા. DSS (મોલેક્યુલર વજન: 36,000–50,000 ડાલ્ટન) MP બાયોલોજિકલ (સાન્ટા એના, યુએસએ) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા. સલ્ફાસાલાઝીન (SASP) (≥ 98% શુદ્ધતા), હેમેટોક્સિલિન અને ઇઓસિન સિગ્મા-એલ્ડ્રિચ (સેન્ટ લૂઇસ, MO, યુએસએ) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા. માઉસ TNF-α, IL-1β અને IL-6 લ્યુમિનેક્સ એલિસા એસે કીટ R&D સિસ્ટમ્સ (મિનેપોલિસ, MN, યુએસએ) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા. એસિટિક એસિડ, પ્રોપિયોનિક એસિડ અને બ્યુટીરિક એસિડ અલાદ્દીન ઇન્ડસ્ટ્રીઝ (શાંઘાઈ, ચીન) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા.2-ઇથિલબ્યુટીરિક એસિડ મર્ક KGaA (ડાર્મસ્ટેડ, જર્મની) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યું હતું.
૬-૮ અઠવાડિયાના નર C57BL/6 ઉંદર (શરીરનું વજન ૧૮-૨૨ ગ્રામ) બેઇજિંગ વેટાહે લેબોરેટરી એનિમલ ટેકનોલોજી કંપની લિમિટેડ (બેઇજિંગ, ચીન) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા અને ૧૨ કલાક પ્રકાશ/અંધારા ચક્ર સાથે ૨૨ ± ૨ °C ના વાતાવરણમાં રાખવામાં આવ્યા હતા. ઉંદરોને નવા વાતાવરણમાં અનુકૂલન સાધવા માટે એક અઠવાડિયા માટે પીવાના પાણીની મફત ઍક્સેસ સાથે પ્રમાણભૂત ઉંદર ખોરાક આપવામાં આવ્યો હતો. ત્યારબાદ ઉંદરોને રેન્ડમલી ચાર જૂથોમાં વિભાજિત કરવામાં આવ્યા હતા: નિયંત્રણ જૂથ, DSS મોડેલ જૂથ, SASP-સારવાર કરાયેલ જૂથ (૨૦૦ મિલિગ્રામ/કિલોગ્રામ, મૌખિક) અને BLG-સારવાર કરાયેલ જૂથ (૧ ગ્રામ/કિલોગ્રામ, મૌખિક). આકૃતિ ૧A માં બતાવ્યા પ્રમાણે, અમારા અગાઉના અભ્યાસ મુજબ, પ્રાયોગિક ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસ ઉંદરોમાં ૧.૮% DSS ના ત્રણ ચક્ર દ્વારા ૫ દિવસ માટે પ્રેરિત કરવામાં આવ્યું હતું, ત્યારબાદ ૭ દિવસ માટે નિસ્યંદિત પાણી દ્વારા, અમારા અગાઉના અભ્યાસ મુજબ.૧૮ SASP અને BLG સારવાર કરાયેલ જૂથોમાં ઉંદરોને અનુક્રમે SASP અને BLG સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી, દિવસ ૦ થી શરૂ કરીને દરરોજ. પ્રારંભિક પ્રયોગોમાં, BLG ની માત્રા 1 ગ્રામ/કિલોગ્રામ પર સેટ કરવામાં આવી હતી. દરમિયાન, સાહિત્ય અનુસાર SASP ની માત્રા 200 મિલિગ્રામ/કિલોગ્રામ પર સેટ કરવામાં આવી હતી.4 નિયંત્રણ અને DSS મોડેલ જૂથોને સમગ્ર પ્રયોગ દરમિયાન સમાન માત્રામાં પાણી મળ્યું.
આકૃતિ 1 BLG ઉંદરોમાં DSS-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસને સુધારે છે.(A) ક્રોનિક રિકરન્ટ કોલાઇટિસ અને સારવારની પ્રાયોગિક ડિઝાઇન, (B) શરીરના વજનમાં ફેરફાર, (C) રોગ પ્રવૃત્તિ સૂચકાંક (DAI) સ્કોર, (D) કોલોન લંબાઈ, (E) કોલોનની પ્રતિનિધિ છબી, (F) H&E સ્ટેનિંગ કોલોન (વિસ્તૃતિ, ×100) અને (G) હિસ્ટોલોજીકલ સ્કોર. ડેટા સરેરાશ ± SEM (n = 6) તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે.##p < 0.01 અથવા ###p < 0.001 વિરુદ્ધ નિયંત્રણ (કોન) જૂથ; *p < 0.05 અથવા **p < 0.01 અથવા ***p < 0.001 વિરુદ્ધ DSS જૂથ.
શરીરનું વજન, મળની સુસંગતતા અને ગુદામાર્ગમાંથી રક્તસ્ત્રાવ દરરોજ રેકોર્ડ કરવામાં આવતો હતો. રોગ પ્રવૃત્તિ સૂચકાંક (DAI) શરીરના વજન, મળની સુસંગતતા અને ગુદામાર્ગમાંથી રક્તસ્ત્રાવના સ્કોર્સને જોડીને નક્કી કરવામાં આવતો હતો, જેમ કે અગાઉ વર્ણવવામાં આવ્યું હતું.19 પ્રયોગના અંતે, બધા ઉંદરોને યુથેનાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા અને વધુ પ્રયોગો માટે લોહી, મળ અને કોલોન એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા.
કોલોન ટીશ્યુ ફોર્મેલિન-ફિક્સ્ડ હતું અને પેરાફિનમાં જડિત હતું. 5-માઇક્રોન વિભાગો બનાવવામાં આવ્યા હતા અને હેમેટોક્સિલિન-ઇઓસિન (H&E) થી સ્ટેન કરવામાં આવ્યા હતા, પછી બ્લાઇન્ડ કરવામાં આવ્યા હતા અને અગાઉ વર્ણવ્યા મુજબ સ્કોર કરવામાં આવ્યા હતા.19
ટ્રાઇઝોલ રીએજન્ટ (ઇન્વિટ્રોજન, કાર્લ્સબેડ, સીએ) દ્વારા કોલોન ટીશ્યુના કુલ આરએનએ કાઢવામાં આવ્યા હતા, ત્યારબાદ રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્ટેઝ (ટાકારા, કુસાત્સુ, શિગા, જાપાન) સાથે સીડીએનએ કાઢવામાં આવ્યું હતું. SYBR ગ્રીન માસ્ટર (રોશે, બેસલ, સ્વિટ્ઝર્લૅન્ડ) સાથે રીઅલ-ટાઇમ પીસીઆર સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને જથ્થાત્મક પીસીઆર કરવામાં આવ્યું હતું. લક્ષ્ય જનીન ટ્રાન્સક્રિપ્ટ્સને β-એક્ટિનમાં સામાન્ય બનાવવામાં આવ્યા હતા અને 2-ΔΔCT પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને ડેટાનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. જનીન પ્રાઇમર સિક્વન્સ કોષ્ટક 1 માં બતાવવામાં આવ્યા છે.
પ્રાથમિક માઉસ કોલોનિક એપિથેલિયલ સેલ આઇસોલેશન અને કલ્ચર અગાઉ વર્ણવ્યા મુજબ કરવામાં આવ્યું હતું.20 સંક્ષિપ્તમાં, 6-8 અઠવાડિયાના ઉંદરોના કોલોનને સર્વાઇકલ ડિસલોકેશન દ્વારા બલિદાન આપ્યા પછી પ્રથમ એક્સાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા, પછી રેખાંશિક રીતે ખોલવામાં આવ્યા હતા, હેન્ક્સ બેલેન્સ્ડ સોલ્ટ સોલ્યુશન (કેલ્શિયમ અને મેગ્નેશિયમ વિના HBSS) સાથે સારવાર કરવામાં આવી હતી અને 0.5-1 મીમી નાના ટુકડાઓમાં કાપવામાં આવ્યા હતા. ત્યારબાદ, પેશીઓને 0.4 મિલિગ્રામ/મિલી કોલેજેનેઝ XI (સિગ્મા, પૂલ, યુકે) સાથે મફત DMEM માધ્યમમાં પચાવવામાં આવ્યા હતા અને ઓરડાના તાપમાને 5 મિનિટ માટે 300 xg પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવ્યા હતા. DMEM માધ્યમમાં (10% ફેટલ બોવાઇન સીરમ, 100 યુનિટ/મિલી પેનિસિલિન, અને 100 µg/મિલી સ્ટ્રેપ્ટોમાસીન સાથે પૂરક) 37 °C પર પેલેટને ફરીથી સસ્પેન્ડ કરો અને નાયલોન મેશ (છિદ્ર કદ ~250 µm)માંથી પસાર કરો. કોલોનિક એપિથેલિયલ કોષોના થોડા અંશ કાચની નીચેની વાનગીઓમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા અને એસિટિક એસિડ, પ્રોપિયોનિક એસિડ, બ્યુટીરિક એસિડ, અને ઉંદરના મળના અર્કને ૩૭°C, ૫% CO2 પર ૨ કલાક માટે રાખો.
કોલોન ટીશ્યુને PBS સાથે એકરૂપ કરવામાં આવ્યું હતું, અને લ્યુમિનેક્સ ELISA એસે કીટ (R&D સિસ્ટમ્સ, મિનિયાપોલિસ, MN, USA) નો ઉપયોગ કરીને કોલોન ટીશ્યુમાં સાયટોકાઇન્સ IL-6, TNF-α અને IL-1β ના સ્તરો શોધી કાઢવામાં આવ્યા હતા. તેવી જ રીતે, પ્રાથમિક મ્યુરિન કોલોનિક એપિથેલિયલ કોષોના સીરમ અને કલ્ચર માધ્યમમાં GLP-1 સ્તરો ઉત્પાદકની સૂચનાઓ અનુસાર ELISA કીટ (બાયોસ્વેમ્પ, વુહાન, ચીન) વડે નક્કી કરવામાં આવ્યા હતા.
મળમાંથી કુલ ડીએનએ ડીએનએ નિષ્કર્ષણ કીટ (ટિઆનજેન, ચીન) નો ઉપયોગ કરીને કાઢવામાં આવ્યો હતો. ડીએનએની ગુણવત્તા અને માત્રા અનુક્રમે 260 nm/280 nm અને 260 nm/230 nm ના ગુણોત્તરમાં માપવામાં આવી હતી. ત્યારબાદ, દરેક નિષ્કર્ષિત ડીએનએનો ઉપયોગ ટેમ્પ્લેટ તરીકે કરીને, વિવિધ પ્રદેશોમાં 16S rRNA જનીનના V3-V4 પ્રદેશોને વિસ્તૃત કરવા માટે ચોક્કસ પ્રાઇમર્સ 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) અને 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) નો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. PCR ઉત્પાદનોને QIAquick Gel નિષ્કર્ષણ કીટ (QIAGEN, જર્મની) નો ઉપયોગ કરીને શુદ્ધ કરવામાં આવ્યા હતા, રીઅલ-ટાઇમ PCR દ્વારા પ્રમાણિત કરવામાં આવ્યા હતા, અને IlluminaMiseq PE300 સિક્વન્સિંગ પ્લેટફોર્મ (Illumina Inc., CA, USA) નો ઉપયોગ કરીને ક્રમ આપવામાં આવ્યા હતા. બાયોઇન્ફોર્મેટિક્સ વિશ્લેષણ માટે, અગાઉ અહેવાલ કરાયેલ પ્રોટોકોલને અનુસરીને ડેટા પ્રોસેસિંગ કરવામાં આવ્યું હતું.21,22 ટૂંકમાં, કાચી એક્સપ્રેસ ફાઇલોને ફિલ્ટર કરવા માટે Cutadapt (V1.9.1) નો ઉપયોગ કરો. OTUs ને ક્લસ્ટર કરવામાં આવ્યા હતા UPARSE (સંસ્કરણ 7.0.1001) 97% ના સમાનતા કટઓફ સાથે, અને UCHIME નો ઉપયોગ કાઇમરિક સિક્વન્સને દૂર કરવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો. SILVA રિબોસોમલ RNA જનીન ડેટાબેઝ પર આધારિત RDP ક્લાસિફાયર (http://rdp.cme.msu.edu/) નો ઉપયોગ કરીને સમુદાય રચના વિશ્લેષણ અને વર્ગીકરણ કરવામાં આવ્યું હતું.
ટૂંકી સાંકળ ફેટી એસિડ્સ (એસિટિક એસિડ, પ્રોપિયોનિક એસિડ અને બ્યુટીરિક એસિડ) નું સ્તર તાઓ અને અન્ય લોકો દ્વારા અગાઉ વર્ણવ્યા મુજબ માપવામાં આવ્યું હતું, જેમાં કેટલાક ફેરફારો કરવામાં આવ્યા હતા.23 ટૂંકમાં, 100 મિલિગ્રામ મળને પહેલા 0.4 મિલી ડીઆયોનાઇઝ્ડ પાણીમાં સસ્પેન્ડ કરવામાં આવ્યું હતું, ત્યારબાદ 0.1 મિલી 50% સલ્ફ્યુરિક એસિડ અને 0.5 મિલી 2-એથિલબ્યુટીરિક એસિડ (આંતરિક ધોરણ) માં નાખવામાં આવ્યું હતું, પછી તેને એકરૂપ કરવામાં આવ્યું હતું અને 4°C પર ગરમ કરવામાં આવ્યું હતું. સેન્ટ્રીફ્યુજ 12,000 rpm પર 15 મિનિટ માટે C પર. સુપરનેટન્ટને 0.5 mL ઈથર સાથે કાઢવામાં આવ્યું હતું અને વિશ્લેષણ માટે GC માં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યું હતું. ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફી (GC) વિશ્લેષણ માટે, ફ્લેમ આયનાઇઝેશન ડિટેક્ટર (FID) થી સજ્જ GC-2010 પ્લસ ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફ (Shimadzu, Inc.) નો ઉપયોગ કરીને નમૂનાઓનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. ZKAT-624 કોલમ, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., China) નો ઉપયોગ કરીને વિભાજન પ્રાપ્ત કરવામાં આવ્યું હતું. GC સોલ્યુશન સોફ્ટવેર (Shimadzu, Inc.) નો ઉપયોગ કરીને ડેટા મેળવવામાં આવ્યો હતો. વિભાજન ગુણોત્તર 10:1 હતો, વાહક ગેસ નાઇટ્રોજન હતો, અને પ્રવાહ દર 6 mL/મિનિટ હતો. ઇન્જેક્શન વોલ્યુમ 1 μL હતું. ઇન્જેક્ટર અને ડિટેક્ટરનું તાપમાન 300°C હતું. ઓવનનું તાપમાન 140°C પર 13.5 મિનિટ માટે રાખવામાં આવ્યું હતું, પછી વધારીને ૧૨૦°C/મિનિટના દરે ૨૫૦°C; તાપમાન ૫ મિનિટ માટે રાખવામાં આવ્યું.
ડેટાને સરેરાશ ± સરેરાશ (SEM) ની માનક ભૂલ તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે. ડેટાનું મહત્વ એક-માર્ગી ANOVA દ્વારા મૂલ્યાંકન કરવામાં આવ્યું હતું અને ત્યારબાદ ડંકનના બહુવિધ શ્રેણી પરીક્ષણ દ્વારા મૂલ્યાંકન કરવામાં આવ્યું હતું. બધી ગણતરીઓ માટે ગ્રાફપેડ પ્રિઝમ 5.0 સોફ્ટવેર (ગ્રાફપેડ સોફ્ટવેર ઇન્ક., સાન ડિએગો, CA, USA) નો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો અને p < 0.05 ને આંકડાકીય રીતે મહત્વપૂર્ણ ગણવામાં આવ્યું હતું.
તે જાણીતું છે કે UC એ પેટમાં તીવ્ર દુખાવો, ઝાડા અને રક્તસ્ત્રાવ સાથેનો ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસ રોગ છે. તેથી, BLG (આકૃતિ 1A) ની એન્ટિ-કોલાઇટિસ અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે ઉંદરોમાં DSS-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસની સ્થાપના કરવામાં આવી હતી. નિયંત્રણ જૂથની તુલનામાં, DSS મોડેલ જૂથના ઉંદરોએ શરીરનું વજન અને DAI નોંધપાત્ર રીતે ઘટાડ્યું હતું, અને BLG સારવારના 24 દિવસ પછી આ ફેરફારો નોંધપાત્ર રીતે ઉલટાવી દેવામાં આવ્યા હતા (આકૃતિ 1B અને C). કોલોન શોર્ટનિંગ UC નું એક મહત્વપૂર્ણ લક્ષણ છે. આકૃતિ 1D અને E માં બતાવ્યા પ્રમાણે, DSS મેળવનારા ઉંદરોની કોલોનની લંબાઈ નોંધપાત્ર રીતે ટૂંકી કરવામાં આવી હતી, પરંતુ BLG સારવાર દ્વારા રાહત મળી હતી. ત્યારબાદ, કોલોનિક બળતરાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે હિસ્ટોપેથોલોજીકલ વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. H&E સ્ટેઇન્ડ છબીઓ અને પેથોલોજીકલ સ્કોર્સ દર્શાવે છે કે DSS વહીવટે કોલોનિક આર્કિટેક્ચરને નોંધપાત્ર રીતે વિક્ષેપિત કર્યું હતું અને ક્રિપ્ટ વિનાશમાં પરિણમ્યું હતું, જ્યારે BLG સારવારે ક્રિપ્ટ વિનાશ અને પેથોલોજીકલ સ્કોર્સને નોંધપાત્ર રીતે ઘટાડ્યા હતા (આકૃતિ 1F અને G). નોંધપાત્ર રીતે, 1 ગ્રામ/કિલોગ્રામની માત્રામાં BLG ની રક્ષણાત્મક અસર તેની સાથે તુલનાત્મક હતી. 200 mg/Kg ની માત્રામાં SASP. સામૂહિક રીતે, આ તારણો સૂચવે છે કે BLG ઉંદરોમાં DSS-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસની તીવ્રતા ઘટાડવામાં અસરકારક છે.
TNF-α, IL-1β અને IL-6 કોલોનિક સોજાના મહત્વપૂર્ણ બળતરા માર્કર છે. આકૃતિ 2A માં બતાવ્યા પ્રમાણે, DSS એ નિયંત્રણ જૂથની તુલનામાં કોલોનમાં TNF-α, IL-1β અને IL-6 ના જનીન અભિવ્યક્તિમાં નોંધપાત્ર વધારો કર્યો. BLG નું વહીવટ આ DSS-મધ્યસ્થી ફેરફારોને નોંધપાત્ર રીતે ઉલટાવી શકે છે. આગળ, અમે કોલોન પેશીઓમાં બળતરા સાયટોકાઇન્સ TNF-α, IL-1β અને IL-6 ના સ્તર નક્કી કરવા માટે ELISA નો ઉપયોગ કર્યો. પરિણામોએ એ પણ દર્શાવ્યું કે DSS સાથે સારવાર કરાયેલા ઉંદરોમાં TNF-α, IL-1β અને IL-6 ના કોલોનિક સ્તરમાં નોંધપાત્ર વધારો થયો હતો, જ્યારે BLG સારવારથી આ વધારો ઓછો થયો (આકૃતિ 2B).
આકૃતિ 2 BLG DSS-સારવાર કરાયેલા ઉંદરોના કોલોનમાં પ્રોઇન્ફ્લેમેટરી સાયટોકાઇન્સ TNF-α, IL-1β અને IL-6 ના જનીન અભિવ્યક્તિ અને ઉત્પાદનને અટકાવે છે.(A) TNF-α, IL-1β અને IL-6 ના કોલોનિક જનીન અભિવ્યક્તિ; (B) TNF-α, IL-1β અને IL-6 ના કોલોનિક પ્રોટીન સ્તર. ડેટા સરેરાશ ± SEM (n = 4–6) તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે.#p < 0.05 અથવા ##p < 0.01 અથવા ###p < 0.001 વિરુદ્ધ નિયંત્રણ (કોન) જૂથ; *p < 0.05 અથવા **p < 0.01 વિરુદ્ધ DSS જૂથ.
UC.24 ના રોગકારકતામાં આંતરડાની ડિસબાયોસિસ મહત્વપૂર્ણ છે કે કેમ તે તપાસવા માટે કે BLG DSS-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોના આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાને મોડ્યુલેટ કરે છે કે કેમ, આંતરડાના સમાવિષ્ટોના બેક્ટેરિયલ સમુદાયનું વિશ્લેષણ કરવા માટે 16S rRNA સિક્વન્સિંગ કરવામાં આવ્યું હતું. વેન ડાયાગ્રામ દર્શાવે છે કે ત્રણેય જૂથો 385 OTU શેર કરે છે. તે જ સમયે, દરેક જૂથમાં અનન્ય OTU (આકૃતિ 3A) હતા. વધુમાં, આકૃતિ 3B અને C માં દર્શાવેલ Chao1 ઇન્ડેક્સ અને શેનોન ઇન્ડેક્સ દર્શાવે છે કે BLG-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોમાં ગટ માઇક્રોબાયોટાની સમુદાય વિવિધતામાં ઘટાડો થયો હતો, કારણ કે BLG-સારવાર કરાયેલ જૂથમાં શેનોન ઇન્ડેક્સમાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો હતો. ત્રણ જૂથોમાં ક્લસ્ટરિંગ પેટર્ન નક્કી કરવા માટે મુખ્ય ઘટક વિશ્લેષણ (PCA) અને મુખ્ય સંકલન વિશ્લેષણ (PCoA) નો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો અને દર્શાવવામાં આવ્યું હતું કે BLG સારવાર પછી DSS-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોનું સમુદાય માળખું સ્પષ્ટ રીતે અલગ થઈ ગયું હતું (આકૃતિ 3D અને E). આ ડેટા સૂચવે છે કે BLG સારવારથી DSS-પ્રેરિત કોલાઇટિસવાળા ઉંદરોના સમુદાય માળખાને નોંધપાત્ર રીતે અસર થઈ હતી.
આકૃતિ 3 BLG DSS-પ્રેરિત કોલાઇટિસવાળા ઉંદરોમાં આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાની વિવિધતામાં ફેરફાર કરે છે. (A) OTU નું વેન ડાયાગ્રામ, (B) ચાઓ1 ઇન્ડેક્સ, (C) શેનોનનો રિચનેસ ઇન્ડેક્સ, (D) પ્રિન્સિપલ કમ્પોનન્ટ એનાલિસિસ (PCA) OTU નું સ્કોર પ્લોટ, (E) OTU પ્રિન્સિપલ કોઓર્ડિનેટ એનાલિસિસ (PCoA) સ્કોર આકૃતિ. ડેટા સરેરાશ ± SEM (n = 6).**p < 0.01 વિ DSS જૂથ તરીકે રજૂ કરવામાં આવ્યો છે.
ફેકલ માઇક્રોબાયોટામાં ચોક્કસ ફેરફારોનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે, અમે બધા વર્ગીકરણ સ્તરે આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાની રચનાનું વિશ્લેષણ કર્યું. આકૃતિ 4A માં બતાવ્યા પ્રમાણે, બધા જૂથોમાં મુખ્ય ફાયલા ફર્મિક્યુટ્સ અને બેક્ટેરોઇડેટ્સ હતા, ત્યારબાદ વેરુકોમાઇક્રોબિયા હતા. નિયંત્રણ ઉંદરોની તુલનામાં DSS-સારવાર કરાયેલા ઉંદરોના ફેકલ માઇક્રોબાયલ સમુદાયોમાં ફર્મિક્યુટ્સ અને ફર્મિક્યુટ્સ/બેક્ટેરોઇડેટ્સ ગુણોત્તરમાં નોંધપાત્ર વધારો થયો હતો, અને BLG સારવાર પછી આ ફેરફારો નોંધપાત્ર રીતે ઉલટાવી દેવામાં આવ્યા હતા. ખાસ કરીને, BLG સારવારથી DSS-પ્રેરિત કોલાઇટિસવાળા ઉંદરોના મળમાં વેરુકોબેક્ટેરિયમની સંબંધિત વિપુલતામાં નોંધપાત્ર વધારો થયો હતો. ઘરગથ્થુ સ્તરે, ફેકલ માઇક્રોબાયલ સમુદાયો Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae અને Prevotellaceae (આકૃતિ 4B) દ્વારા કબજે કરવામાં આવ્યા હતા. DSS જૂથની તુલનામાં, BLG ના ઘટાડાથી Akkermansiaceae ની વિપુલતામાં વધારો થયો, પરંતુ Lachnospiraceae ની વિપુલતામાં ઘટાડો થયો અને રુમિનોકોકેસી. નોંધનીય રીતે, જીનસ સ્તરે, ફેકલ માઇક્રોબાયોટા Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia અને Prevotellaceae_UCG-001 (આકૃતિ 4C) દ્વારા કબજે કરવામાં આવ્યું હતું. આ શોધ એ પણ દર્શાવે છે કે BLG સારવારે DSS પડકારના પ્રતિભાવમાં માઇક્રોબાયોટા અસંતુલનને અસરકારક રીતે ઉલટાવી દીધું, જે Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas અને Oscillibacter માં ઘટાડો અને Akkermansia અને Prevotellaceae_UCG-001 માં વધારો દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે.
આકૃતિ 4 BLG DSS-પ્રેરિત કોલાઇટિસ ઉંદરોમાં આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાની વિપુલતાને બદલે છે. (A) ફિલમ સ્તરે આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાની વિપુલતા; (B) કુટુંબ સ્તરે આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાની વિપુલતા; (C) જીનસ સ્તરે આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાની વિપુલતા. ડેટા સરેરાશ ± SEM (n = 6) તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે.#p < 0.05 અથવા ###p < 0.001 વિરુદ્ધ નિયંત્રણ (કોન) જૂથ; *p < 0.05 અથવા **p < 0.01 અથવા ***p < 0.001 વિરુદ્ધ DSS જૂથ.
શોર્ટ-ચેઇન ફેટી એસિડ્સ (SCFAs) એ Akkermansia અને Prevotellaceae_UCG-001 ના મુખ્ય ચયાપચય છે તે ધ્યાનમાં લેતા, જ્યારે આંતરડાના લ્યુમેનમાં એસિટેટ, પ્રોપિયોનેટ અને બ્યુટાયરેટ સૌથી વધુ વિપુલ પ્રમાણમાં SCFAs છે, 25-27 અમે હજુ પણ અમારા અભ્યાસમાં છીએ. આકૃતિ 5 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, DSS-સારવાર કરાયેલા જૂથમાં ફેકલ એસિટેટ, પ્રોપિયોનેટ અને બ્યુટાયરેટ સાંદ્રતામાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો હતો, જ્યારે BLG સારવાર આ ઘટાડાને મોટાભાગે દબાવી શકે છે.
આકૃતિ 5. BLG DSS-પ્રેરિત કોલાઇટિસવાળા ઉંદરોના મળમાં SCFAs નું સ્તર વધારે છે. (A) મળમાં એસિટિક એસિડનું પ્રમાણ; (B) મળમાં પ્રોપિયોનિક એસિડનું પ્રમાણ; (C) મળમાં બ્યુટીરિક એસિડનું પ્રમાણ. ડેટા સરેરાશ ± SEM (n = 6) તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે.#p < 0.05 અથવા ##p < 0.01 વિરુદ્ધ નિયંત્રણ (કોન) જૂથ; *p < 0.05 અથવા **p < 0.01 વિરુદ્ધ DSS જૂથ.
અમે જીનસ-લેવલ ડિફરન્શિયલ SCFA અને ફેકલ માઇક્રોબાયોટા વચ્ચે પિયર્સન સહસંબંધ ગુણાંકની ગણતરી કરી. આકૃતિ 6 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, અક્કરમેન્સિયા પ્રોપિયોનિક એસિડ (પિયર્સન = 0.4866) અને બ્યુટીરિક એસિડ (પિયર્સન = 0.6192) ના ઉત્પાદન સાથે હકારાત્મક રીતે સંકળાયેલું હતું. તેનાથી વિપરીત, એન્ટરમોનાસ અને ઓસિલોબેક્ટર બંને અનુક્રમે 0.4709 અને 0.5104 ના પિયર્સન ગુણાંક સાથે, એસિટેટ ઉત્પાદન સાથે નકારાત્મક રીતે સંકળાયેલા હતા. તેવી જ રીતે, રુમિનોકોકેસી_યુસીજી-014 અનુક્રમે પ્રોપિયોનિક એસિડ (પિયર્સન = 0.4508) અને બ્યુટીરિક એસિડ (પિયર્સન = 0.5842) ના ઉત્પાદન સાથે નકારાત્મક રીતે સંકળાયેલું હતું.
આકૃતિ 6 વિભેદક SCFAs અને કોલોનિક સૂક્ષ્મજીવાણુઓ વચ્ચે પિયર્સન સહસંબંધ વિશ્લેષણ. (A) એસિટિક એસિડ સાથે એન્ટરોમોનાસ; (B) એસિટિક એસિડ સાથે કોન્કશન બેસિલસ; (C) અક્કરમેન્સિયા વિરુદ્ધ પ્રોપિયોનિક એસિડ; (D) રુમિનોકોકસ_UCG-014 પ્રોપિયોનિક એસિડ સાથે; (E) બ્યુટીરિક એસિડ સાથે અક્કરમેન્સિયા; (F) ) રુમિનોકોકસ _UCG-014 બ્યુટીરિક એસિડ સાથે.
ગ્લુકોગન જેવું પેપ્ટાઇડ-1 (GLP-1) એ પ્રોગ્લુકાગોન (Gcg) નું કોષ-પ્રકાર-વિશિષ્ટ પોસ્ટ-ટ્રાન્સલેશનલ ઉત્પાદન છે જેમાં બળતરા વિરોધી ગુણધર્મો છે.28 આકૃતિ 7 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, DSS એ Gcg mRNA અભિવ્યક્તિમાં નોંધપાત્ર ઘટાડો પ્રેરિત કર્યો. કોલોન અને BLG સારવાર નિયંત્રણ જૂથ (આકૃતિ 7A) ની તુલનામાં DSS-પ્રેરિત Gcg ઘટાડાને નોંધપાત્ર રીતે ઉલટાવી શકે છે. તે જ સમયે, DSS-સારવાર કરાયેલ જૂથમાં સીરમમાં GLP-1 નું સ્તર નોંધપાત્ર રીતે ઘટ્યું હતું, અને BLG સારવાર મોટાભાગે આ ઘટાડાને અટકાવી શકે છે (આકૃતિ 7B). શોર્ટ-ચેઇન ફેટી એસિડ્સ G-પ્રોટીન-કપ્લ્ડ રીસેપ્ટર 43 (GRP43) અને G-પ્રોટીન-કપ્લ્ડ રીસેપ્ટર 41 (GRP41) સક્રિયકરણ દ્વારા GLP-1 સ્ત્રાવને ઉત્તેજીત કરી શકે છે, તેથી અમે કોલાઇટિસ ઉંદરના કોલોનમાં GPR41 અને GRP43 ની પણ તપાસ કરી અને જાણવા મળ્યું કે DSS પડકાર પછી GRP43 અને GPR41 ની કોલોનિક mRNA અભિવ્યક્તિ નોંધપાત્ર રીતે ઘટી ગઈ હતી, અને BLG સારવાર અસરકારક રીતે આને બચાવી શકે છે. ઘટે છે (આકૃતિ 7C અને D).
આકૃતિ 7 BLG DSS-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોમાં સીરમ GLP-1 સ્તર અને કોલોનિક Gcg, GPR41 અને GRP43 mRNA અભિવ્યક્તિમાં વધારો કરે છે. (A) કોલોન પેશીઓમાં Gcg mRNA અભિવ્યક્તિ; (B) સીરમમાં GLP-1 સ્તર; (C) કોલોન પેશીઓમાં GPR41 mRNA અભિવ્યક્તિ; (D) કોલોન પેશીઓમાં GPR43 mRNA અભિવ્યક્તિ. ડેટા સરેરાશ ± SEM (n = 5–6) તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે.#p < 0.05 અથવા ##p < 0.01 વિરુદ્ધ નિયંત્રણ (કોન) જૂથ; *p < 0.05 વિરુદ્ધ DSS જૂથ.
BLG સારવાર DSS-સારવાર કરાયેલા ઉંદરોમાં સીરમ GLP-1 સ્તર, કોલોનિક Gcg mRNA અભિવ્યક્તિ અને ફેકલ SCFA સ્તરમાં વધારો કરી શકે છે, તેથી અમે પ્રાથમિક મ્યુરિન કોલોનિક ઉપકલા કોષોમાંથી GLP-1 ના પ્રકાશન પર નિયંત્રણ (F-Con), DSS કોલાઇટિસ (F-Con) -DSS) અને BLG-સારવાર કરાયેલ કોલાઇટિસ (F-BLG) ઉંદરોની વધુ તપાસ કરી. આકૃતિ 8A માં બતાવ્યા પ્રમાણે, 2 mM એસિટિક એસિડ, પ્રોપિયોનિક એસિડ અને બ્યુટીરિક એસિડ સાથે સારવાર કરાયેલા પ્રાથમિક માઉસ કોલોનિક ઉપકલા કોષોએ અનુક્રમે GLP-1 ના પ્રકાશનને નોંધપાત્ર રીતે ઉત્તેજિત કર્યું, જે અગાઉના અભ્યાસો સાથે સુસંગત છે.29,30 તેવી જ રીતે, બધા F-Con, F-DSS, અને F-BLG (0.25 ગ્રામ મળ સમકક્ષ) એ પ્રાથમિક મ્યુરિન કોલોનિક ઉપકલા કોષોમાંથી GLP-1 ના પ્રકાશનને ખૂબ ઉત્તેજિત કર્યું. નોંધનીય રીતે, F-DSS-સારવાર કરાયેલા પ્રાથમિક માઉસ કોલોનિક ઉપકલા કોષો દ્વારા મુક્ત કરાયેલ GLP-1 ની માત્રા તેના કરતા ઘણી ઓછી હતી. F-Con અને F-BLG-સારવાર કરાયેલ પ્રાથમિક માઉસ કોલોનિક એપિથેલિયલ કોષો. (આકૃતિ 8B). આ ડેટા સૂચવે છે કે BLG સારવારથી આંતરડાના SCFA-ઉત્પન્ન GLP-1 ઉત્પાદનમાં નોંધપાત્ર સુધારો થયો.
આકૃતિ 8 BLG-ઉત્પન્ન SCFA પ્રાથમિક મ્યુરિન કોલોનિક ઉપકલા કોષોમાંથી GLP-1 ના પ્રકાશનને ઉત્તેજિત કરે છે.(A) એસિટિક એસિડ, પ્રોપિયોનિક એસિડ અને બ્યુટીરિક એસિડ પ્રાથમિક મ્યુરિન કોલોનિક ઉપકલા કોષોમાંથી GLP-1 ના પ્રકાશનને ઉત્તેજિત કરે છે; (B) ફેકલ અર્ક F-Con, F-DSS અને F-BLG ઉત્તેજિત પ્રાથમિક મ્યુરિન કોલોનિક ઉપકલા કોષો GLP-1 ની માત્રા મુક્ત કરે છે. કોલોનિક ઉપકલા કોષોના અંશને કાચના તળિયે પેટ્રી ડીશમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા અને અનુક્રમે 2 mM એસિટિક એસિડ, પ્રોપિયોનિક એસિડ, બ્યુટીરિક એસિડ અને ફેકલ અર્ક F-Con, F-DSS અને F-BLG (0.25 ગ્રામ મળ સમકક્ષ) સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી. 37°C પર 2 કલાક, અનુક્રમે 5% CO2. પ્રાથમિક મ્યુરિન કોલોનિક એપિથેલિયલ કોષોમાંથી મુક્ત થયેલ GLP-1 નું પ્રમાણ ELISA દ્વારા શોધી કાઢવામાં આવ્યું હતું. ડેટા સરેરાશ ± SEM (n = 3) તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે.#p < 0.05 અથવા ##p < 0.01 વિરુદ્ધ ખાલી અથવા F-કોન; *p < 0.05 વિરુદ્ધ F-DSS.
સંક્ષેપ: એસ, એસિટિક એસિડ; પ્રો, પ્રોપિયોનિક એસિડ; જોકે, બ્યુટીરિક એસિડ; એફ-કોન, નિયંત્રણ ઉંદરોમાંથી મળનો અર્ક; એફ-ડીએસએસ, કોલાઇટિસ ઉંદરોમાંથી મળનો અર્ક; એફ-બીએલજી, બીએલજી-સારવાર કરાયેલ કોલોનમાંથી બળતરા ઉંદરોના મળના અર્ક.
વિશ્વ આરોગ્ય સંસ્થા દ્વારા પ્રત્યાવર્તન રોગ તરીકે સૂચિબદ્ધ, યુસી વૈશ્વિક ખતરો બની રહ્યો છે; જોકે, રોગની આગાહી, નિવારણ અને સારવાર માટેની અસરકારક પદ્ધતિઓ હજુ પણ મર્યાદિત છે. તેથી, UC માટે નવી સલામત અને અસરકારક ઉપચારાત્મક વ્યૂહરચનાઓનું અન્વેષણ અને વિકાસ કરવાની તાત્કાલિક જરૂર છે. પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવાઓની તૈયારીઓ એક આશાસ્પદ વિકલ્પ છે કારણ કે સદીઓથી ચીની વસ્તીમાં UC ની સારવારમાં ઘણી પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવાઓની તૈયારીઓ અસરકારક સાબિત થઈ છે, અને તે બધી જૈવિક કાર્બનિક અને કુદરતી સામગ્રી છે જે મોટે ભાગે મનુષ્યો અને પ્રાણીઓ માટે હાનિકારક છે.31,32 આ અભ્યાસનો ઉદ્દેશ્ય UC ની સારવાર માટે સલામત અને અસરકારક પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવાઓની તૈયારી શોધવાનો અને તેની ક્રિયા કરવાની પદ્ધતિનું અન્વેષણ કરવાનો હતો.BLG એ ફ્લૂની સારવાર માટે વપરાતું જાણીતું ચાઇનીઝ હર્બલ ફોર્મ્યુલા છે.8,33 અમારી પ્રયોગશાળા અને અન્યમાં કામ કરીને દર્શાવવામાં આવ્યું છે કે BLG જેવા જ કાચા માલમાંથી પ્રોસેસ્ડ પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવા ઉત્પાદન, ઈન્ડિગો, માનવો અને પ્રાણીઓમાં UC ની સારવારમાં નોંધપાત્ર અસરકારકતા દર્શાવે છે.4,34 જો કે, BLG ની કોલાઇટિસ વિરોધી અસરો અને તેની અસરો પદ્ધતિ અસ્પષ્ટ છે. વર્તમાન અભ્યાસમાં, અમારા પરિણામો દર્શાવે છે કે BLG અસરકારક રીતે DSS-પ્રેરિત કોલોનિક બળતરાને ઓછું કરે છે, જે મોડ્યુલેશન સાથે સંકળાયેલ છે. આંતરડાના માઇક્રોબાયોટાનું વિશ્લેષણ અને આંતરડામાંથી મેળવેલા GLP-1 ઉત્પાદનનું પુનઃસ્થાપન.
તે જાણીતું છે કે UC માં વજન ઘટાડવું, ઝાડા, ગુદામાર્ગ રક્તસ્રાવ અને વ્યાપક કોલોનિક મ્યુકોસલ નુકસાન જેવા લાક્ષણિક ક્લિનિકલ લક્ષણો સાથે રિલેપ્સિંગ પીરિયડ્સ દ્વારા વર્ગીકૃત કરવામાં આવે છે.35 આમ, ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસનું સંચાલન પાંચ દિવસ માટે 1.8% DSS ના ત્રણ ચક્ર દ્વારા કરવામાં આવ્યું હતું, ત્યારબાદ સાત દિવસ પીવાનું પાણી આપવામાં આવ્યું હતું.આકૃતિ 1B માં બતાવ્યા પ્રમાણે, વધઘટ થતા વજન ઘટાડા અને DAI સ્કોર્સે ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસના સફળ ઇન્ડક્શનનો સંકેત આપ્યો હતો.BLG સાથે સારવાર કરાયેલા જૂથના ઉંદરોએ દિવસ 8 થી અપશિફ્ટ રિકવરી દર્શાવી હતી, જે દિવસ 24 થી નોંધપાત્ર રીતે અલગ હતી.DAI સ્કોરમાં પણ સમાન ફેરફારો જોવા મળ્યા હતા, જે કોલાઇટિસના ક્લિનિકલ સુધારણામાં સુધારો સૂચવે છે.કોલોનની ઇજા અને બળતરા સ્થિતિના સંદર્ભમાં, કોલોનની લંબાઈ, કોલોન પેશીઓને નુકસાન, અને જનીન અભિવ્યક્તિ અને કોલોન પેશીઓમાં પ્રોઇન્ફ્લેમેટરી સાયટોકાઇન્સ TNF-α, IL-1β, અને IL-6 નું ઉત્પાદન પણ BLG સારવાર પછી ખૂબ જ સુધર્યું હતું.સામૂહિક રીતે, આ પરિણામો સ્પષ્ટપણે દર્શાવે છે કે BLG ઉંદરોમાં ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસની સારવારમાં અસરકારક છે.
BLG તેની ફાર્માકોલોજિકલ અસરો કેવી રીતે કરે છે?અગાઉના અસંખ્ય અભ્યાસોએ દર્શાવ્યું છે કે ગટ માઇક્રોબાયોટા UC ના પેથોજેનેસિસમાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે, અને માઇક્રોબાયોમ-આધારિત અને માઇક્રોબાયોમ-લક્ષિત ઉપચાર UC ની સારવાર માટે ખૂબ જ આકર્ષક વ્યૂહરચના તરીકે ઉભરી આવ્યા છે.હાલના અભ્યાસમાં, અમે દર્શાવ્યું છે કે BLG સારવારના પરિણામે ગટ માઇક્રોબાયોટા રચનામાં નોંધપાત્ર ફેરફારો થયા છે, જે સૂચવે છે કે DSS-પ્રેરિત કોલાઇટિસ સામે BLG ની રક્ષણાત્મક અસર ગટ માઇક્રોબાયોટાના મોડ્યુલેશન સાથે સંબંધિત છે.આ અવલોકન એ ખ્યાલ સાથે સુસંગત છે કે ગટ માઇક્રોબાયોટાના હોમિયોસ્ટેસિસને ફરીથી પ્રોગ્રામ કરવું એ TCM તૈયારીઓની અસરકારકતાને સમજવા માટે એક મહત્વપૂર્ણ અભિગમ છે.36,37 નોંધનીય રીતે, અક્કરમેન્સિયા એક ગ્રામ-નેગેટિવ અને કડક રીતે એનારોબિક બેક્ટેરિયમ છે જે ગટના મ્યુકસ સ્તરમાં રહે છે, જે મ્યુસિન્સને ડિગ્રેડ કરે છે, પ્રોપિયોનિક એસિડ ઉત્પન્ન કરે છે, ગોબ્લેટ સેલ ડિફરન્શનને ઉત્તેજિત કરે છે, અને મ્યુકોસાને જાળવી રાખે છે. અવરોધ અખંડિતતાનું કાર્ય.26 બહુવિધ ક્લિનિકલ અને પ્રાણી ડેટા સૂચવે છે કે અક્કરમેન્સિયા સ્વસ્થ મ્યુકોસા,38 અને અક્કરમેન્સિયા spp ના મૌખિક વહીવટ સાથે ખૂબ સંકળાયેલ છે. મ્યુકોસલ સોજામાં નોંધપાત્ર સુધારો કરી શકે છે.39 અમારા વર્તમાન ડેટા સૂચવે છે કે BLG સારવાર પછી અક્કરમેન્સિયાની સંબંધિત વિપુલતામાં નોંધપાત્ર વધારો થયો છે. વધુમાં, Prevotellaceae_UCG-001 એક SCFA-ઉત્પાદક બેક્ટેરિયમ છે.27 બહુવિધ અભ્યાસો દર્શાવે છે કે કોલાઇટિસવાળા પ્રાણીઓના મળમાં Prevotellaceae_UCG-001 ઓછી સંબંધિત વિપુલતામાં જોવા મળ્યું હતું.40,41 અમારા વર્તમાન ડેટા એ પણ દર્શાવે છે કે BLG સારવાર DSS-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોના કોલોનમાં Prevotellaceae_UCG-001 ની સંબંધિત વિપુલતામાં નોંધપાત્ર વધારો કરી શકે છે. તેનાથી વિપરીત, Oscillibacter એક મેસોફિલિક, કડક રીતે એનારોબિક બેક્ટેરિયમ છે.42 એ અહેવાલ આપ્યો છે કે UC ઉંદરોમાં Oscillibacter ની સંબંધિત વિપુલતામાં નોંધપાત્ર વધારો થયો હતો અને તે IL-6 અને IL-1β સ્તરો અને પેથોલોજીકલ સ્કોર્સ સાથે નોંધપાત્ર રીતે હકારાત્મક રીતે સંકળાયેલું હતું.43,44 નોંધપાત્ર રીતે, BLG સારવારથી DSS-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોના મળમાં Oscillibacter ની સંબંધિત વિપુલતામાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો.નોંધનીય રીતે, આ BLG-બદલાયેલા બેક્ટેરિયા સૌથી વધુ SCFA-ઉત્પાદક બેક્ટેરિયા હતા.અગાઉના અસંખ્ય અભ્યાસોએ સંભવિતતા દર્શાવી છે કોલોનિક સોજા અને આંતરડાના ઉપકલા અખંડિતતાના રક્ષણ પર SCFAs ની ફાયદાકારક અસરો.45,46 અમારા વર્તમાન ડેટામાં એ પણ જોવા મળ્યું છે કે BLG-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોમાં DSS-સારવાર કરાયેલ મળમાં SCFA એસિટેટ, પ્રોપિયોનેટ અને બ્યુટીરેટની સાંદ્રતામાં ઘણો વધારો થયો હતો. એકસાથે લેવામાં આવે તો, આ તારણો સ્પષ્ટપણે દર્શાવે છે કે BLG સારવાર ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસવાળા ઉંદરોમાં DSS-પ્રેરિત SCFA-ઉત્પાદક બેક્ટેરિયાને અસરકારક રીતે વધારી શકે છે.
GLP-1 એ મુખ્યત્વે ઇલિયમ અને કોલોનમાં ઉત્પન્ન થતું ઇન્ક્રિટિન છે અને ગેસ્ટ્રિક ખાલી થવામાં વિલંબ કરવામાં અને ભોજન પછી લોહીમાં શર્કરા ઘટાડવામાં મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવે છે.47 પુરાવા સૂચવે છે કે ડિપેપ્ટિડિલ પેપ્ટીડેઝ (DPP)-4, એક GLP-1 રીસેપ્ટર એગોનિસ્ટ, અને GLP-1 નેનોમેડિસિન ઉંદરોમાં આંતરડાની બળતરાને અસરકારક રીતે દૂર કરી શકે છે.48-51 અગાઉના અભ્યાસોમાં અહેવાલ મુજબ, ઉચ્ચ SCFA સાંદ્રતા મનુષ્યો અને ઉંદરોમાં પ્લાઝ્મા GLP-1 સ્તર સાથે સંકળાયેલી હતી. 52 અમારા વર્તમાન ડેટા દર્શાવે છે કે BLG સારવાર પછી, સીરમ GLP-1 સ્તર અને Gcg mRNA અભિવ્યક્તિ નોંધપાત્ર રીતે વધી હતી. તેવી જ રીતે, DSS-સારવાર કરાયેલ કોલાઇટિસ ઉંદરોમાંથી મળના અર્ક સાથે ઉત્તેજનાની તુલનામાં BLG-સારવાર કરાયેલ કોલાઇટિસ ઉંદરોમાંથી મળના અર્ક સાથે ઉત્તેજનાને પગલે કોલોનિક સંસ્કૃતિઓમાં GLP-1 સ્ત્રાવ નોંધપાત્ર રીતે વધ્યો હતો. SCFAs GLP-1 ના પ્રકાશનને કેવી રીતે અસર કરે છે?ગ્વેન ટોલહર્સ્ટ એટ અલ. અહેવાલ આપ્યો છે કે SCFA GRP43 અને GPR41 દ્વારા GLP-1 સ્ત્રાવને ઉત્તેજીત કરી શકે છે.29 અમારા વર્તમાન ડેટા એ પણ દર્શાવે છે કે BLG સારવાર DSS-સારવાર કરાયેલ ઉંદરોના કોલોનમાં GRP43 અને GPR41 ના mRNA અભિવ્યક્તિમાં નોંધપાત્ર વધારો કરે છે. આ ડેટા સૂચવે છે કે BLG સારવાર GRP43 અને GPR41 ને સક્રિય કરીને SCFA-પ્રમોટેડ GLP-1 ઉત્પાદનને પુનઃસ્થાપિત કરી શકે છે.
BLG એ ચીનમાં લાંબા ગાળાની ઓવર-ધ-કાઉન્ટર (OTC) દવા છે. કુનમિંગ ઉંદરોમાં BLG ની મહત્તમ સહન માત્રા 80 ગ્રામ/કિલોગ્રામ છે, અને કોઈ તીવ્ર ઝેરી અસર જોવા મળી નથી.53 હાલમાં, માનવોમાં BLG (ખાંડ વગર) ની ભલામણ કરેલ માત્રા 9-15 ગ્રામ/દિવસ (દિવસમાં 3 વખત) છે.અમારા અભ્યાસમાં દર્શાવવામાં આવ્યું છે કે 1 ગ્રામ/કિલોગ્રામ પર BLG ઉંદરોમાં DSS-પ્રેરિત ક્રોનિક રિલેપ્સિંગ કોલાઇટિસને સુધારે છે.આ માત્રા ક્લિનિકલી ઉપયોગમાં લેવાતા BLG ડોઝની નજીક છે.અમારા અભ્યાસમાં એ પણ જાણવા મળ્યું છે કે તેની ક્રિયા કરવાની પદ્ધતિ, ઓછામાં ઓછા આંશિક રીતે, ગટ માઇક્રોબાયોટામાં ફેરફાર દ્વારા મધ્યસ્થી કરવામાં આવે છે, ખાસ કરીને SCFA-ઉત્પાદક બેક્ટેરિયા, જેમ કે Akkermansia અને Prevotellaceae_UCG-001, ગટ-વ્યુત્પન્ન GLP-1 ઉત્પાદનને પુનઃસ્થાપિત કરવા માટે.આ તારણો સૂચવે છે કે BLG ક્લિનિકલ કોલાઇટિસ સારવાર માટે સંભવિત ઉપચારાત્મક એજન્ટ તરીકે વધુ વિચારણાને પાત્ર છે.જો કે, તે ગટ માઇક્રોબાયોટાને મોડ્યુલેટ કરે છે તે ચોક્કસ પદ્ધતિ માઇક્રોબાયોટા-ઉણપવાળા ઉંદરો અને ફેકલ બેક્ટેરિયલ ટ્રાન્સપ્લાન્ટેશન દ્વારા પુષ્ટિ કરવાની બાકી છે.
એસ, એસિટિક એસિડ; પરંતુ, બ્યુટીરિક એસિડ; BLG, પાન્ડન; DSS, ડેક્સ્ટ્રાન સોડિયમ સલ્ફેટ; DAI, રોગ પ્રવૃત્તિ સૂચકાંક; DPP, ડિપેપ્ટિડિલ પેપ્ટીડેઝ; FID, જ્યોત આયનીકરણ ડિટેક્ટર; F-કોન, ઉંદરોના ફેકલ અર્કને નિયંત્રિત કરે છે; F-DSS, DSS કોલાઇટિસ ઉંદરોના ફેકલ અર્ક; F-BLG, BLG-સારવાર કરાયેલ કોલાઇટિસ ઉંદરોના ફેકલ અર્ક; GLP-1, ગ્લુકોગન જેવા પેપ્ટાઇડ-1; Gcg, ગ્લુકોગન; ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફી, ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફી; GRP43, G પ્રોટીન-કપ્લ્ડ રીસેપ્ટર 43; GRP41, G પ્રોટીન-કપ્લ્ડ રીસેપ્ટર 41; H&E, હેમેટોક્સિલિન-ઇઓસિન; HBSS, હેન્ક્સનું સંતુલિત મીઠું દ્રાવણ; OTC, OTC; PCA, મુખ્ય ઘટક વિશ્લેષણ; PCoA, મુખ્ય સંકલન વિશ્લેષણ; પ્રો, પ્રોપિયોનિક એસિડ; SASP, સલ્ફાસાલાઝિન; SCFA, શોર્ટ-ચેઇન ફેટી એસિડ્સ; ચાઇનીઝ દવા, પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવા; યુસી, અલ્સેરેટિવ કોલાઇટિસ.
પેકિંગ યુનિવર્સિટી શેનઝેન-હોંગકોંગ યુનિવર્સિટી ઓફ સાયન્સ એન્ડ ટેકનોલોજી મેડિકલ સેન્ટર (શેનઝેન, ચીન) ની એનિમલ એથિક્સ કમિટી દ્વારા સંસ્થાકીય માર્ગદર્શિકા અને પ્રાણી નિયમો (નૈતિકતા નંબર A2020157) અનુસાર તમામ પ્રાયોગિક પ્રોટોકોલને મંજૂરી આપવામાં આવી હતી.
બધા લેખકોએ વિભાવના અને ડિઝાઇન, ડેટા સંપાદન, અથવા ડેટા વિશ્લેષણ અને અર્થઘટનમાં નોંધપાત્ર યોગદાન આપ્યું; લેખનો મુસદ્દો તૈયાર કરવામાં અથવા મહત્વપૂર્ણ બૌદ્ધિક સામગ્રીનું વિવેચનાત્મક રીતે પુનરાવર્તન કરવામાં ભાગ લીધો; વર્તમાન જર્નલમાં હસ્તપ્રત સબમિટ કરવા સંમત થયા; આખરે પ્રકાશન માટે સંસ્કરણને મંજૂરી આપી; કાર્યના તમામ પાસાઓ માટે જવાબદાર.
આ કાર્યને નેશનલ નેચરલ સાયન્સ ફાઉન્ડેશન ઓફ ચાઇના (81560676 અને 81660479), શેનઝેન યુનિવર્સિટીના પ્રથમ-વર્ગના પ્રોજેક્ટ (86000000210), શેનઝેન સાયન્સ એન્ડ ટેકનોલોજી ઇનોવેશન કમિટી ફંડ (JCYJ20210324093810026), અને ગુઆંગડોંગ પ્રાંતીય મેડિકલ સાયન્સ એન્ડ ટેકનોલોજી રિસર્ચ ફંડ (A2020157 અને A2020272), ગુઇઝોઉ મેડિકલ યુનિવર્સિટી ફાર્મસી ગુઇઝોઉ પ્રાંત દ્વારા ભંડોળ પૂરું પાડવામાં આવ્યું હતું. કી લેબોરેટરી (YWZJ2020-01) અને પેકિંગ યુનિવર્સિટી શેનઝેન હોસ્પિટલ (JCYJ2018009) દ્વારા ભંડોળ પૂરું પાડવામાં આવ્યું હતું.
1. તાંગ બી, ઝુ જે, ઝાંગ બી, એટ અલ. ઉંદરોમાં ડેક્સ્ટ્રાન સોડિયમ સલ્ફેટ-પ્રેરિત પ્રાયોગિક કોલાઇટિસમાં બળતરા વિરોધી એજન્ટ તરીકે ટ્રિપ્ટોલાઇડની ઉપચારાત્મક સંભાવના.pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. કપલાન જીજી. IBD નો વૈશ્વિક બોજ: 2015 થી 2025 સુધી. નેટ રેવ ગેસ્ટ્રોએન્ટેરોલ હેપેટોલ.2015;12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. પેંગ જે, ઝેંગ ટીટી, લી ઝુ, એટ અલ. છોડમાંથી મેળવેલા આલ્કલોઇડ્સ: બળતરા આંતરડાના રોગમાં આશાસ્પદ રોગ સુધારકો.પ્રીફાર્માકોલોજી.2019;10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, et al.Indigo Naturalis ઉંદરોમાં DSS-પ્રેરિત કોલાઇટિસમાં કોલોનિક ઓક્સિડેટીવ તણાવ અને Th1/Th17 પ્રતિભાવોને અટકાવે છે.Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. ચેન એમ, ડીંગ વાય, ટોંગ ઝેડ. અલ્સેરેટિવ કોલાઇટિસની સારવારમાં સોફોરા ફ્લેવસેન્સ (સોફોરા ફ્લેવસેન્સ) ચાઇનીઝ હર્બલ દવાની અસરકારકતા અને સલામતી: ક્લિનિકલ પુરાવા અને સંભવિત પદ્ધતિઓ.પ્રીફાર્માકોલોજી.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. કાઓ ફેંગ, લિયુ જી, શા બેનક્સિંગ, પાન એચએફ. કુદરતી ઉત્પાદનો: બળતરા આંતરડા રોગની સારવાર માટે પ્રાયોગિક રીતે અસરકારક દવાઓ. કુર ફાર્માસ્યુટિકલ્સ.2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. ઝાંગ સી, જિયાંગ એમ, લુ એ. પરંપરાગત ચાઇનીઝ દવા સાથે અલ્સેરેટિવ કોલાઇટિસની સહાયક સારવાર પર પ્રતિબિંબ. ક્લિનિકલ રેવ એલર્જી ઇમ્યુનાઇઝેશન.2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. લી ઝોંગટેંગ, લી લી, ચેન ટીટી, વગેરે. મોસમી ઈન્ફલ્યુએન્ઝાની સારવારમાં બાનલેન્જેન ગ્રાન્યુલ્સની અસરકારકતા અને સલામતી: રેન્ડમાઇઝ્ડ કંટ્રોલ્ડ ટ્રાયલ માટે એક અભ્યાસ પ્રોટોકોલ.ટ્રાયલ.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x